学术专栏
生化分析仪双试剂R1、R2消耗量不对等的解决办法

在生化室日常工作中,大家会发现:在双试剂测试项目中,总是R2用完了,而R1尚余很多,随着检验次数的累积,这种效应越加明显,留下来的R1留之无用,弃之可惜。


生化试剂R1、R2消耗量不对等的原因:


如果查阅仪器说明书,可以发现生化试剂在使用过程中是有损耗的,这种效应是由于仪器本身设计有试剂 ”取样/ 富余量“所致,多数仪器都存在这种问题。

仪器在试剂瓶转移到反应杯的过程中,会多吸入大概5ul的量,R1、R2同样的加试剂办法,到最后会出现什么情况呢?以ALT试剂为例,规格R1为200ml,R2为50ml,正常情况下仪器参数设为:样品20ul; R1为160ul,R2为40ul,实际吸试剂时,R2每次吸的量是45ul,这样R2将在1111次测试后用完,而R1在1111*(160+5)次测试后,用量为183ml,富余量为17ml,相同批号试剂累积到5盒时,R1的富余量将是85ml。


解决思路:


在双试剂测试中,R1 一般为缓冲液, R2为反应物质混合物。设想: 两试剂按二种不同比例混合,其所含反应物成分、构成比不变,只是反应物浓度不同,而反应物浓度不同对测定中的反应实质没有影响,只对反应的有效检测线性范围有影响;在样品量不变的情况下,如果适当增加反应物浓度,其线性范围变宽,浓度减低, 则线性范围变窄;而如果同时将样品量也减少一些,则仅是曲线的斜率略降低(灵敏度略降低),而线性范围几乎不受影响;对于酶类速率法测定来说,在没有校准品时, 所提供的K 值有意义,不能轻易改动,而在有校准品时,K 值是可以调整的。


解决办法:


如果处于节约试剂的考虑,如上例ALT项目可采取:R1 设定量不变,R2 新设定量为为36ul。样品新设定量= 原设定量(20ul) *(36/40) = 18ul,用校准品重新定标。


结果:


R2采用新设定量36ul,总的测试数变为1219次,比原先1111次增加了119次,增加了10%的测试数,即实现了节省试剂成本10%;理论上,牺牲了很小的检测灵敏度,实际应用中,室间质评和室内质控都没有影响。


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